胎牛血清 Q&A

2024-12-13

1. 血清如何正确储存?

·血清应储存在﹣20℃条件下,其有效期可长达5 年;

·血清在解冻后,可置于2-8℃条件下储存2-4 周;

·如果解冻后的血清使用时间较长超过4 周,建议无菌分装为合适的体积并重新冻存。也可以考虑订购我们50ml 规格的胎牛血清。

2. 血清如何正确解冻?

·可先将冻存的血清转移至 2-8℃条件,再移入室温逐步解冻;

·解冻过程中,不断地轻轻摇晃使血清混合均匀,勿造成过多气泡,减少沉淀产生;

·不建议将血清直接于 37℃或更高温度解冻,容易造成蛋白凝聚或变性形成沉淀;

·反复冻融会造成血清的沉淀增多,建议对新购置的血清分装冻存,减少解冻次数

3. 血清中会产生沉淀的原因?

·进行热灭活处理;

·经γ辐照;

·直接置于室温或37℃水浴解冻;

·长期于2-8℃储存;

·解冻过程中混合不均匀;

·反复冻融

4. 血清中的沉淀是什么?如何去除?

·最常见的沉淀主要是纤维蛋白(絮状沉淀)和脂蛋白,以及磷酸钙、胆固醇、脂肪酸和一些其他类型的蛋白质,并不影响血清品质,可不做处理;·若需去除这些絮状沉淀,可根据沉淀大小,将血清分装至适合的无菌离心管中,以500-1000g5-10min 稍做离心,取上清液配制成完全培养基后再过滤使用。

5. 如何判断血清是否污染?

·检查血清外包装是否有破损;

·静置一段时间后,肉眼观察血清是否始终表现浑浊;

·最好最直接的方法是将血清接种在血琼脂平板上,培养后观察是否有菌落形成

6. 什么是γ辐照血清?

·常规血清经过无菌过滤后暴露于25-35 kGy 剂量的钴-60 源制得的血清;

·作为最有效的病毒灭活方法之一,能进一步减少可能的因微生物引起的低污染水平,最大限度地降低与动物源成分相关的风险;

·γ辐照不会降低血清的理化特性或细胞培养性能

7. 血清热灭活的作用?是否有必要热灭活?

·血清热灭活是在血清完全解冻下,充分摇匀后置于 56℃水浴中 30min;·加热可使补体失活,适用于免疫学研究包括胚胎干细胞(ESCs)、昆虫细胞和平滑肌细胞的培养;

·热灭活对于大多数细胞是不需要的,会使血清中部分营养成分损失,影响血清质量,从而造成细胞生长速率降低;

·由于较高温度的处理,容易使蛋白质聚集,会增加沉淀的产生。所以非必要,不需要对血清进行热灭活

8. 如何减小血清批间差带来的影响?

·建议尽可能在同一研究项目或实验中使用同一批次的血清;

·严格控制操作条件,保持实验条件的一致性,包括培养条件、培养基配方等;

·对每个新批次血清进行测试和验证,确保其适用于细胞类型和具体应用;

·记录各批次血清的使用情况和实验结果,分析批次之间的差异,以便进一步优化实验设计和血清选择


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